基于国产微滴数字PCR的SNP快速检测技术研究

摘要：

目的 在法医学领域,现有的SNP检测主要依赖进口,检测工作量大、耗时长且成本较高.微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)作为新一代的PCR技术,可以快速检测低浓度样本DNA,且有较强的抗干扰能力.本研究旨在国产ddPCR平台建立SNP分型检测体系并对其性能进行评估,以探讨ddPCR技术在法医学检验领域的应用价值.方法 在ddPCR平台建立高原适应性 EPAS1 单倍型(rs 115321619、rs73926263、rs73926264、rs73926265 和 rs55981512)检测体系,测试各位点引物探针特异性,对体系的准确性、稳定性、灵敏度、检材适应性进行评估,并比较了 ddPCR和SNaPshot微测序检测体系的抗抑制性,最后对样本地区来源进行测试.结果 ddPCR在2.5 h内即可快速获取检测结果,体系准确性和稳定性好,检测灵敏度为0.312 5 ng,且抗抑制性能力突出.70份测试样本检测结果与背景信息一致.结论 基于ddPCR的SNP检测体系具有准确可靠、简便快速、抗抑制能力强等优势,在法医学快速检验领域有较强的应用潜力,适合法医现场检验需求.

关键词：微滴数字PCR、法医学检验、SNP分型

所属期刊栏目：49

分类号：R89;D919.2(法医学)

资助基金：国家自然科学基金81772027

在线出版日期：2022-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：1123-1134