靶向Wnt信号的溶瘤腺病毒抑制肝癌干细胞研究
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球第五大癌症并成为癌症死亡的主要原因,传统治疗早期肝癌取得了一定的进展,但是癌症的复发、转移和耐药仍未得到根本解决,这些现象可通过癌症干细胞理论(cancer stem cell,CSC)进行解释.本研究通过悬浮富集培养的方法,获得了MHCC-97H细胞的三维立体球细胞(sphere cell),并检测其干细胞特性,通过删除5型腺病毒的E1A CR2区域24 bp碱基,并用Wnt活性转录元件TCF/TEF调控E1A基因表达,同时插入抗癌基因TSLC1,得到了双靶向溶瘤腺病毒Ad.wnt-E 1A(△24 bp)-TSLC1,通过MTT、结晶紫染色实验、Hoechst、细胞划痕、蛋白质印迹技术、Transwell及免疫荧光技术检测重组病毒对肝癌类干细胞的EMT(epithelial-mesenchymal transition)转化、杀伤、凋亡以及迁移的作用.结果表明,悬浮富集培养的MHCC-97H sphere细胞具有自我更新、分化能力、静息性以及耐药性,高表达肝癌干细胞表面标志物(如CD133等),重组病毒处理后表现出明显的杀伤效果及抑制细胞迁移与侵袭的特性,靶向抑制MHCC-97H sphere细胞能力更强(P＜0.001),且重组病毒能有效诱导肝癌类干细胞通过caspase途径发生凋亡.因此,重组病毒Ad.wnt-E 1A(△24 bp)-TSLC1有可能成为靶向肝癌干细胞的治疗药物,具有一定的临床应用前景.
肝癌类干细胞、溶瘤腺病毒、Wnt信号通路、TSLC1
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R735.7(肿瘤学)
国家自然科学基金81272687;浙江省自然科学基金LZ13H160004,LY16H160056;浙江省大学生科技创新活动计划2016R406007资助项目.This work was supported by grants from The National Natural Science Foundation of China81272687;Zhejiang Provincial Natural Science Foundation of ChinaLZ13H160004,LY16H160056;College Students” Science and Technology Innovation Activities in Zhejiang Province2016R406007
2017-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共12页
326-337
