五个3-酮脂酰ACP合成酶同源蛋白的功能鉴定

摘要：

大肠杆菌的FabB和FabF均具有长链3-酮基脂酰ACP合成酶活性.除参与长链饱和脂酰链的延伸外,FabB还是合成不饱和脂肪酸的关键酶之一,参与不饱和脂酰ACP的从头合成,最终生成顺-9-十六烯脂酰ACP.而FabF只能将顺-9-十六烯脂酰ACP延伸为顺-11-十八烯脂酰ACP,不参与不饱和脂酰ACP的从头合成.有研究表明,粪肠球菌、乳酸乳球菌、丙酮丁醇梭菌和茄科雷尔氏菌等细菌的FabF同源蛋白,具有类似大肠杆菌FabB和FabF的双功能.为证实该现象是否普遍存在,本研究选取了枯草芽孢杆菌BsfabF、中华苜蓿根瘤菌SmfabF、霍乱弧菌VcfabF、铜绿假单胞菌Pafab F1和PafabF25个同源基因进行功能鉴定,体外酶学分析表明,5个FabF同源蛋白均具有长链3-酮基脂酰ACP合成酶活性,异体互补大肠杆菌CL28的脂肪酸组分分析显示,SmfabF、VcfabF、PafabF1和ParabF2具有3-酮脂酰ACP合成酶Ⅱ(FabF)活性,遗传互补大肠杆菌温度敏感突变株CY242和CY244的研究显示,仅有Pafab F2编码的蛋白拥有3-酮脂酰ACP合成酶Ⅰ (FabB)活性,能互补大肠杆菌fabB的突变.这表明不是所有的FabF同源蛋白均具有3-酮脂酰ACP合成酶Ⅰ和Ⅱ的双重活性.

关键词：细菌脂肪酸合成、3-酮基脂酰ACP合成酶Ⅰ、3-酮脂酰ACP合成酶Ⅱ、遗传互补

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资助基金：国家自然科学基金31200028,高等学校博士学科点专项科研基金20104404110005和广东高校优秀青年创新人才培养计划LYM10038资助项目;This work was supported by grants from The National Natural Science Foundation of China 31200028,Specialized Research Fund for the Doctoral Program of Higher Education20104404110005 and Foundation for Distinguished Young Talents in Higher Education of Guangdong LYM10038.

在线出版日期：2014-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：887-895