基于超滤膜辅助的糖蛋白全N-连接糖链的富集和质谱解析

摘要：

糖基化作为一种常见的蛋白质翻译后修饰,对蛋白质的空间结构、生物功能等具有重要的影响.解析糖蛋白糖链结构有助于更清楚地认识糖蛋白及其功能.本研究建立了一种基于超滤膜富集血清中糖蛋白全N-连接糖链,并利用质谱技术对糖链结构进行分析的方法.根据糖蛋白及其糖链结构之间的分子质量差异,利用Millipore公司的10ku超滤膜富集血清糖蛋白上酶解(PNGase F)释放的全N-连接糖链,并使用MALDI-TOF/TOF-MS解析糖链结构.通过该技术可以从血清中富集并鉴定到23种独特的N-连接的糖链结构,并且利用二级质谱进行了结构确认.该方法可以被用于从大量生物样本中富集糖蛋白全N-连接糖链,可以达到快速、高通量地解析糖蛋白N-连接糖链的目的.

关键词：N-连接糖链、超滤膜辅助的糖蛋白全N-连接糖链富集法、超滤膜、糖蛋白、MALDI-TOF/TOF-MS

所属期刊栏目：41

分类号：Q513+.2(蛋白质)

资助基金：教育部高等学校博士学科点专项科研基金20106101110012;科技部国际科技合作计划项目2009DFA32730;grants from Doctoral Fund of Ministry of Education of China20106101110012;The International S&T Cooperation Program 2009DFA32730 from The Chinese Ministry of Science and Technology

在线出版日期：2014-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：403-408