荧光偏振技术研究Bloom解旋酶催化核心与双链DNA的相互作用
Bloom综合症(BLM)解旋酶是RecQ家族DNA解旋酶中的一个重要成员,参与了DNA复制、修复、转录、重组以及端粒的维持等细胞代谢过程,在维持染色体的稳定性中具有重要的作用.BLM解旋酶的突变可导致Bloom综合症,患者遗传不稳定易患多种类型癌症.本研究运用荧光偏振技术研究BLM解旋酶催化核心(BLM642～1290)与双链DNA(dsDNA)的相互作用,分析其相关特征参数,了解BLM642～1290解旋酶与dsDNA的结合和解链特性.结果表明:BLM642～1290解旋酶与dsDNA的结合和解链与dsDNA 3'端的单链DNA(ssDNA)长度有关；解旋酶优先结合于dsDNA底物的ssDNA末端,且每分子解旋酶可结合9.6 nt的ssDNA; dsDNA 3'端ssDNA的长度为9.6 nt时,解旋酶的解链效率达到最大且不再随其长度而变化.另外,BLM642～1290解旋酶也能够结合和解链钝末端dsDNA,但其结合亲和力和解链效率低子有3'端ssDNA的dsDNA.推测BLM642～1290解旋酶在与dsDNA底物结合和解链时是单体形式,可能以尺蠖的形式解开dsDNA.这些结果可为进一步研究BLM解旋酶的功能特征提供理论基础.
Bloom解旋酶、DNA结合、DNA解链、荧光偏振技术
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O657.32(分析化学)
国家重点基础研究发展计划973资助项目2010CB534912;教育部博士点基金200806570003;贵州省优秀人才省长资金200822;贵州省国际合作项目黔科合外G字[2011]7008号;贵州大学研究生创新基金农科2012027
2013-05-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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