番茄ARF2蛋白的生物信息学分析与亚细胞定位

摘要：

克隆番茄(Solanum lycopersicum)ARF2基因,并分析其分子特性和亚细胞定位,为研究其功能提供基础.通过生物信息学方法分析SlARF2基因编码蛋白的理化性质和分子特性.采用RT-PCR技术从番茄果实cDNA中扩增SIARF2基因全长,并构建与黄色荧光蛋白(YFP)融合的pBA-ARF2-YFP表达载体,进而再通过农杆菌介导的遗传转化方法,将重组质粒转化到野生型番茄中,将得到的T1代转基因种子萌发,然后取根尖通过荧光显微镜观察了融合蛋白在活细胞内分布的特点.生物信息学分析结果表明,S1ARF2是富含Ser、Leu、Gly和Pro以及具有ARF家族典型结构域的可溶性蛋白,其氨基酸序列与葡萄、木薯和拟南芥的同源性分别为70.08％、66.94％和60.87％.经酶切和测序分析证实pBA-ARF2-YFP融合表达载体构建成功,此外,PCR分析表明融合蛋白在转基因植株中得到表达.经荧光显微镜观察,ARF2定位在细胞核中.表明转录因子S1ARF2定位在细胞核中,对番茄果实发育和成熟起重要作用.

关键词：ARF2、生物信息学分析、表达载体的构建、亚细胞定位

所属期刊栏目：39

分类号：Q945(植物学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家高技术研究发展计划（863计划）;新疆建设兵团博士基金

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：51-58