14-3-3参与apelin-13促进大鼠血管平滑肌细胞增殖ERK1/2信号途径研究
本室以前已经报道了G蛋白偶联受体APJ的内源性配体多肽,apelin- 13,通过激活ERK1/2促进大鼠血管平滑肌细胞增殖,本文研究14-3-3信号蛋白是否参与apelin- 13促进大鼠血管平滑肌细胞增殖ERK1/2信号途径,探讨apelin/APJ系统的细胞信号转导机制,组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMCs; Western blotting方法检测14-3-3、pRaf-1、Raf-1、pERKl/2、ERK1/2、cyclinD1、cyclinE的表达；MTT方法观察14-3-3抑制剂Difopein对VSMCs的增殖作用；免疫共沉淀方法检测14-3-3和Raf-1蛋白复合物的形成.Western blotting方法结果显示,apelin-13(0、0.5、1、2、4μmol/L)浓度依赖性刺激大鼠VSMCs 14-3-3表达、Raf-1和ERK1/2磷酸化,以2μmol/L最为明显;2μmol/L apelin-13时间依赖性刺激大鼠VSMCs 14-3-3表达、Raf-1和ERK1/2磷酸化,在4h增加最为显著；14-3-3蛋白抑制剂Difopein明显抑制apelin- 13诱导的Raf-1磷酸化、ERK1/2磷酸化、cyclinD1及cyclinE表达；免疫共沉淀方法发现apelin- 13诱导14-3-3与Raf-1结合增加,而Difopein明显抑制两者结合；MTT法显示Difopein明显抑制apelin- 13诱导的血管平滑肌细胞增殖.上述结果表明,Apelin-13通过14-3-3/Raf-1复合物-ERK1/2信号转导通路促进大鼠血管平滑肌细胞增殖.
apelin、APJ、14-3-3、血管平滑肌细胞、ERK1/2、Raf-1
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R966(药理学)
国家自然科学基金;衡阳市科技局;教育部留学回国人员科研启动基金;湖南省高等学校科技创新团队支持计划
2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1153-1161
