人源抗滋养层细胞表面抗原-2基因工程抗体Fab的制备及特性分析

摘要：

应用噬菌体抗体库技术制备全人源抗滋养层细胞表面抗原-2(Trop-2)特异性Fab抗体片段.抗体库经细胞筛选和固相抗原筛选,获得特异性的阳性克隆.阳性载体经核酸序列分析后,构建工程菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析,呈现28 ku和32 ku大小的两条蛋白质条带.Fab分子经流式细胞术、细胞免疫荧光检测,结果表明,Fab能够与BxPc3细胞膜蛋白特异性结合,而与NIH3T3细胞不结合.免疫共沉淀与质谱分析结果表明,该Fab分子能够与Trop-2蛋白特异性结合.免疫组化显示,该抗体可结合胰腺癌细胞膜蛋白,在细胞培养液中加入Fab,能够抑制BxPc3细胞的生长.以上研究结果提示,该抗体有望成为胰腺癌临床影像诊断或治疗的候选分子.

关键词：噬菌体抗体库、胰腺癌、人源抗Trop-2抗体

所属期刊栏目：37

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：南京市医学科技发展重点项目;南京市科技发展计划

在线出版日期：2010-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1101-1107