油菜黄化突变体蛋白质组分析:两种蛋白质提取方法比较

摘要：

以芥菜型油菜黄化突变体L638-y及其野生型L638-g五叶期叶片为材料,用IEF/SDS-PAGE双向凝胶电泳技术对两种不同蛋白质提取方法(TCA/丙酮沉淀法和改进的PEG分级沉淀法)进行了比较,同时在IPG胶条pH范围及SDS-PAGE胶浓度选择上进行了探索与优化.结果表明,以pH 4～7 17 cm的线性IPG胶条进行IEF,11%SDS-PAGE进行第二向电泳,每350 μl体系上样量为180 μg,蛋白质可以得到较好的分离,2-DE图谱质量最佳.用改进的PEG分级沉淀法提取的突变体L638-y叶片总蛋白的2-DE图谱可清晰识别的蛋白质点数目为(1235±6)个,比TCA/丙酮沉淀法多识别出330个蛋白质点;用该方法提取蛋白质时,在突变体L638-y与其野生型L638-g叶片总蛋白2-DE图谱上可识别出差异蛋白质点数目为190个,比用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质时多鉴别出100个差异蛋白质点.由此表明,研究芥菜型油菜黄化突变体L638-y叶片蛋白质组变化,采用改进的PEG分级沉淀法提取蛋白质更为简单有效.

关键词：芥菜型油菜、黄化突变体、叶片蛋白、蛋白质提取、双向电泳

所属期刊栏目：37

分类号：Q51;Q946.1(蛋白质)

资助基金：国家油菜产业技术体系项目;西北农林科技大学拔尖人才支持计划

在线出版日期：2010-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1025-1032