小鼠肌肉生长抑制素基因短发夹RNA促进MYOD在C2C12细胞中的表达
肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)属于转化生长因子-β(trantsforming growIh factor-β,TGF-β)超家族,主要功能为负向调节骨骼肌的生长.肌肉生长抑制素基因敲除小鼠肌肉出现显著增加,而将干涉该基因的短发夹RNA注射并电击转化入大鼠胫前肌则引起肌肉重量、肌纤维以及MHCⅡ表达的增加.通过与小鼠肌肉生长抑制素基因表达载体共转染HEK293细胞,筛选到两条能够高效抑制小鼠肌肉生长抑制素基因表达的小干涉RNA.构建了这两条小RNA的表达载体Mst-shRNA1和Mst-shRNA2,用其分别转染小鼠C2C12成肌细胞,并通过G418药物筛选和流式细胞仪富集整合了短发夹RNA表达载体的阳性细胞.通过采用Real-time PCR和Western blot分析,检测到在分别整合了Mst-shRNA1和Mst-shRNA2的C2C12细胞中,内源性肌肉生长抑制素基因的mRNA水平分别下降了10.2%和35.5%,蛋白质表达则分别下降了29.3%和64.7%.同时,在这两组中MyoD的表达上升了24.4%和40.4%,证明通过RNA干涉实现的肌肉生长抑制素基因的抑制导致了下游MyoD基因表达的上调.这些结果表明内源性产生的肌肉生长抑制素基因小干涉RNA能够有效抑制该基因的表达.这种以RNA干涉技术为基础促进肌肉生长的方法为遗传育种提供了一种新技术,能够在对家畜经济性状的改良中发挥重要作用.
肌肉生长抑制素、RNA干涉、小干涉RNA、短发夹RNA、MyoD
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Q74;Q291(生物小分子的结构和功能)
国家自然科学基金;国家重点基础研究发展计划（973计划）
2010-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
451-459
