促红细胞生成素基因修饰的胎肝基质细胞促进脐血CD34+细胞向红系分化

摘要：

通过重组慢病毒系统感染人胎肝基质细胞(fetalliver stromal cells,FLSCs),建立了能够稳定高效表达促红细胞生成素(etythropoietin,EPO)的细胞株EPO/FLSCs.从胎儿肝脏克隆EPO基因,构建重组慢病毒EPO的表达载体,感染FLSCs,根据荧光表达强弱进行流式分选,获得能够继续稳定传代的高表达EPO基因的FLSCs,RT-PCR和ELISA结果证实,细胞株中的EPO基因稳定表达.RT-PCR结果显示,FLSCs的EPO在mRNA水平的表达分别是未转染FLSCs和转染空载体FLSCs的5.63倍和5.71倍.ELISA法检测了转染重组慢病毒EPO表达载体的FLSCs EPO蛋白表达水平,结果显示EPO蛋白的表达水平也明显升高.收集EPO/FLSCs的条件培养基,体外诱导脐血CD34+细胞向造血细胞分化,结果显示向红系定向分化的细胞比例明显居多,有可能为临床细胞治疗提供稳定、高质量的细胞来源.

关键词：胎儿肝脏、基质细胞、慢病毒、促红细胞生成素、转基因

所属期刊栏目：37

分类号：R36(病理学)

资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）;国家重点基础研究发展计划（973计划）;科技计划

在线出版日期：2010-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：381-388