EB病毒LMP1-CTAR3对NP69细胞增殖和蛋白质表达的影响
为了探讨EB病毒潜伏性膜蛋白1(LMP1)第三个功能活性区域(CTAR3)在鼻咽上皮细胞NP69中的转化作用机制,采用逆病毒感染的方法,将浓缩的逆病毒RV-LMP1和RV-LMP1△232~351分别感染鼻咽上皮细胞NP69,建立NP69-LMP1与NP69-LMP1△232~351稳定表达细胞系.通过绘制生长曲线、平皿克隆形成试验和软琼脂集落形成试验比较野生型和突变型LMP1对NP69细胞增殖的影响,运用蛋白质组学方法鉴定NP69-LMP1与NP69-LMP1△232~351细胞间的差异表达蛋白,选用实时荧光定量RT-PCR与Western blot对其中部分蛋白质点差异表达进行验证.结果发现:a.突变型LMP1△232~351促NP69细胞增殖的能力较野生型LMP1明显降低(n=3,P<0.05);b.鉴定了LMP1-CTAR3在NP69细胞中参与调节的16个蛋白质(表达上调的蛋白质8个,下调的8个).c.实时荧光定量RT-PCR和Western blot证实了部分上述蛋白质的差异表达.以上结果说明,LMP1-CTAR3是其发挥促细胞增殖的重要活性部位,可能通过参与调节G蛋白和异柠檬酸脱氢酶等蛋白质的表达而起作用.
EB病毒、潜伏性膜蛋白1、羧基端功能活性区域3、差异表达蛋白
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R318.0(医用一般科学)
国家自然科学基金30470668;湖南省自然科学基金07JJ6164;湖南省卫生厅科研基金B2006-100;湖南省重点科学建设经费资助项目
2009-06-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
580-586