截断型线粒体凋亡诱导因子相互作用蛋白质的筛选与鉴定

摘要：

线粒体凋亡诱导因子(AIF)是一类存在于线粒体内外膜之间保守的黄素蛋白,它从线粒体到细胞核的转何可诱导细胞凋亡.AIF诱导细胞凋亡的确切机制还小是很清楚.为了筛选可能与截断型AIF存在相互作用的蛋白质,探讨截断型AIF诱导细胞凋亡的机制,用逆转录PcR扩增剪切掉线粒体定位信号的人AIF基因片段并克隆入pcDNA3.1载体,导入肝癌HepG2细胞.成功检测到截断型布转录与翻译水平上的表达.提取转染截断型AIF基因的细胞的蛋白质,用免疫沉淀方法分离上j截断型可能存在相互作卅的蛋白质,用基质辅助激光解析电离飞行行时间质谱对分离得到的蛋白质进行鉴定,其中一蛋白质条带经鉴定为β-adctin.冉次用反向免疫共沉淀法与westem blot法对筛选出的可能相互作用蛋白质进行验证.结果表明,截断型AIF与β-actin之间可能存在相互作用.

关键词：凋亡诱导凶子、细胞、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱、免疫共沉淀

所属期刊栏目：36

分类号：Q7;Q2;Q6

在线出版日期：2009-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：42-48