抗小鼠PLRP1多克隆抗体的制备以及特异性鉴定和应用

摘要：

小鼠胰泡细胞表达和分泌一种被称为胰甘油三脂酶(PTL)的脂肪酶,主要参与食物来源的甘油三脂的消化吸收,胰泡细胞同时也表达胰脂肪酶相关蛋白1(PLRPl),它同PTL具有很高的同源性.为了研究PLRPl的生物学功能,需要制备其抗体.应用谷胱甘肽S-转移酶(GST)表达系统表达了GST融合蛋白,亲和纯化后用以免疫新西兰大白兔,获得了抗PLRPl的多克隆抗体.免疫印迹分析表明,该多克隆抗血清能检测出0.6ng的融合蛋白抗原以及在3 μg的小鼠胰液提取物中检测出PLRPI蛋白.在证明抗体的特异性方面,尝试了一种新的方法:用PLRPl基因剔除的小鼠作为阴性对照,通过免疫印迹和免疫组化实验证明了该多克隆抗血清具有很高的特异性.进一步的研究发现,进食能促进胰腺中PLRPl的外分泌,这表明PLRPl可能在食物的消化过程中具有一定的生物学功能.

关键词：特异性、胰脂肪酶相关蛋白1、多克隆抗体、GST融合蛋白

所属期刊栏目：35

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：grants from Science and Technology Commission of Shanghai Municipality54319939, 06XD14014;E-Institutes of Shanghai Municipal Education CommissionE03003;上海市科委重大项目54319939,06XD14014;上海市教育局E-研究院资助项目E03003

在线出版日期：2009-02-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1410-1416