DNA重组酶Cre介导载体间基因的重组转移

摘要：

DNA重组酶Cre可以识别LoxP位点,使含有LoxP位点的DNA分子发生重组:2个同向LoxP之间的DNA片段被删除,2个环状DNA分子被整合为一个大分子.基于Cre酶的这些作用特性,构建了一套载体间基因的重组转移体系,在Cre酶的作用下,gfp基因被从基因供体pTLG上切除下来,然后转移到基因受体pET-LoxP上,从而快速、简便地完成了gfp基因高效表达载体pET-gfp的构建.gfp基因在大肠杆菌BL21(DE3)中被诱导表达,使菌落产生了可视的绿色荧光.通过对荧光菌落的计数分析,比较了环状基因供体pTLG和线性基因供体pTLG对有效重组率的影响.使繁琐的传统载体构建变为简单的酶促反应,极大地简化了载体构建步骤,为Cre酶在基因克隆和亚克隆中的应用提供了很好的研究基础.

关键词：DNA重组酶Cre、基因供体pTLG、基因受体pET-LoxP、gfp基因、绿色荧光菌落

所属期刊栏目：34

分类号：Q783.2(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30271066;30571512;国家重点基础研究发展计划973计划TG1999016005;引进国际先进农业科技计划948计划2006-4-C01-03

在线出版日期：2007-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1210-1215