柔嫩艾美耳球虫重组鸡痘病毒的构建与免疫保护研究

摘要：

以鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杂交株F2的RNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增了杂交株F2的Rhomboid蛋白家族相关基因,将PCR产物克隆至pMD18-T载体中,构建出克隆质粒pMD-Rhomboid.以Kpn Ⅰ、Pst Ⅰ双酶切重组质粒pMD-Rhomboid和鸡痘病毒载体质粒pUTA2,并将纯化的Rhomboid基因亚克隆至鸡痘病毒载体pUTA2复合启动子下游,构建出真核表达重组质粒pUTA-Rhomboid.采用脂质体转染技术,将该质粒转染FPV 282E4株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,通过BrdU药物加压筛选,并通过RT-PCR和蛋白质印迹等方法检测,筛选出一株球虫鸡痘重组病毒rFPV-Rhomboid.进一步经CEF扩增病毒后,免疫雏鸡,监测免疫指标.结果表明:重组病毒接种鸡外周血中的CD4+、CD8+含量显著高于非免疫对照组(P＜0.05);与对照组相比,重组病毒对鸡的增重效果差异显著(P＜0.05),对E.tenella的攻击具有一定的保护作用,显示出较好的应用前景.

关键词：柔嫩艾美耳球虫、重组鸡痘病毒、构建、表达、免疫保护

所属期刊栏目：33

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

资助基金：国家自然科学基金30170696

在线出版日期：2006-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1099-1105