应用蛋白质组学技术筛选胃癌耐药相关蛋白质

摘要：

胃癌多药耐药性是临床胃癌化疗失败最主要的原因之一,但其分子机制仍然不太清楚.为了寻找新的胃癌耐药相关的蛋白质,揭示胃癌多药耐药的分子机制,以胃癌细胞SGC7901和长春新碱诱导的耐药胃癌细胞SGC7901/VCR为研究对象,应用二维凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)技术分离两种细胞的总蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)及电喷雾电离串联质谱(electrospray ionization tandem mass spectrometry,ESI-Q-TOF)对差异表达的蛋白质点进行鉴定,蛋白质印迹和实时RT-PCR验证部分差异蛋白质在两株细胞中的表达水平,反义核酸转染技术分析HSP27(heat shock protein 27,HSP27)高表达与SGC7901/VCR耐药的相关性.得到了分辨率较高、重复性较好的两株细胞系的二维凝胶电泳图谱,质谱分析共鉴定了24个差异蛋白质点,蛋白质印迹和实时RT-PCR验证了部分差异蛋白的表达水平,反义寡核苷酸抑制HSP27表达能增加SGC7901/VCR对长春新碱的敏感性.研究结果不仅提示这些差异蛋白质如HSP27,Sorcin等可能与胃癌的多药耐药相关,而且为揭示胃癌细胞的多药耐药性产生机制提供了线索.

关键词：长春新碱、胃癌、多药耐药、蛋白质组、二维凝胶电泳、质谱、免疫印迹、定量PCR、反义核苷酸

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分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：教育部跨世纪优秀人才培养计划教育部科技函[2004]48;湖南省重大科技专项基金2004XK1001

在线出版日期：2006-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：267-276