一个用于转染细胞分选的双顺反子载体的构建及其应用

摘要：

为简化转染细胞的分选过程,构建了一个含有细胞表面标志CD34基因的双顺反子载体p3.1-IRES-CD34.利用来源于脑心肌炎病毒(EMCV)的内部核糖体进入位点(IRES),实现目的基因与CD34基因的共同表达.将绿色荧光蛋白(EGFP)作为目的基因插入载体的多克隆位点,然后转染NIH-3T3细胞,通过免疫磁珠分选(MACS)方法来分选细胞.结果表明:对于转染细胞,均可实现快速分选(瞬时转染细胞约48 h,稳定转染10～15天),并且获得较高纯度(95%以上)的表达目的基因细胞.

关键词：载体、转染细胞、分选、CD34

所属期刊栏目：32

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2002AA205050,2003AA205160;国家重点基础研究发展计划973计划2001CB509906;北京市科委自然科学基金H020220010190

在线出版日期：2005-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：889-894