Red/ET同源重组介导细菌人工染色体的快速修饰

摘要：

随着基因组测序工程的实施与完成,如何对包含完整基因信息的特定细菌人工染色体(BAC)进行有目的修饰,己成为功能基因组学研究的一个重要环节.应用新近优化的Red/ET同源重组技术对目标BAC进行修饰,以pSC101-BAD-gbaA为依托质粒,采用rpsL-neo为正/反向筛选系统,可以快速、高效地对BAC进行剪切、插入、替换等操作,其中能够进行抗性筛选的一步BAC修饰只需一周时间,以插入非抗性标记基因Cre为代表的两步BAC修饰在两周内即可完成.通过阿拉伯多糖诱导调控和简单地变化培养温度,能使pSC101-BAD-gbaA依托质粒在发挥完Red/ET同源重组作用后自然消失,最终获得完整而纯净的修饰后BAC,为加快功能基因组学研究提供了一个可靠的实验平台.

关键词：Red/ET同源重组、BAC修饰、功能基因组

所属期刊栏目：32

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30230360;第三军医大学校科研和教改项目

在线出版日期：2005-06-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：468-473