重组小鼠canstatin N端片段对鸡胚新生血管生成的抑制作用

摘要：

为了研究重组小鼠canstatin N端片段的体内抗血管生成活性,通过PCR扩增小鼠canstatin N端片段cDNA,定向克隆于原核表达载体pET30a(+)中,构建小鼠canstatin N端片段重组表达载体pET-mCanN,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹检测小鼠canstatin N端片段的表达.结果表明,IPTG诱导原核表达载体pET-mCanN在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中高效表达,小鼠canstatin N端片段表达量约占菌体总蛋白量的18%,小鼠canstatin N端片段主要以包涵体形式存在,包涵体经过洗涤、裂解、Ni～spin column亲合柱层析以及蛋白质复性等步骤纯化后,获得了纯度约为92%的重组小鼠canstatin N端片段.鸡胚绒毛尿囊膜(chicken embryo choriollantoic membrane,CAM)实验表明,原核表达的小鼠canstafin N端片段能有效地按剂量依赖的方式抑制鸡胚新生血管的形成.

关键词：canstatin、肿瘤血管生成抑制剂、原核表达

所属期刊栏目：31

分类号：R730.23(肿瘤学)

资助基金：河南省科技攻关项目0122032200;国家自然科学基金30270031

在线出版日期：2004-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：991-995