反义adipophilin寡核苷酸降低ACAT活性

摘要：

已经发现,随着细胞内胆固醇酯的积聚,adipophilin的表达明显增加.在此基础上,为了寻找adipophilin在细胞内胆固醇代谢的作用点.小鼠腹腔巨噬细胞与80 mg/L OxLDL或80 mg/L OxLDL加1 mmol/L adipophilin反义寡核苷酸共孵育,在不同的时间点取样,使用免疫荧光染色,流式细胞仪分析和细胞内胆固醇测定.结果显示,72 h后,反义寡核苷酸处理组细胞内胆固醇酯显著下降到(19.9±1.9)mg/g,油红O染色显示,该组细胞质内红色脂滴明显减少.96 h的观察期间内,两组细胞adipophilin蛋白的表达量都增加.从12 h开始,未用反义寡核苷酸处理组adipophilin蛋白的表达量开始大于反义寡核苷酸处理组.在96 h时间点,统计学处理,未用反义寡核苷酸处理组明显高于反义寡核苷酸处理组,差别有显著性.使用Ox-r[CL-3H]LDL观察两组细胞摄入OxLDL的量,实验发现,两组细胞摄入Ox-r[CL-3H]LDL的量逐渐增加.但是,反义寡核苷酸处理组摄入Ox-r[CL-3H]LDL的量从24 h后明显低于未用反义寡核苷酸处理组,在48 h和96 h时间点,统计学处理,两组差别有显著性.观察ACAT的活性发现,ACAT相对活性从6 h到48 h表现为增加,但从48 h到96 h,ACAT相对活性趋于稳定.在48 h时间点,两组比较差别有显著性,反义寡核苷酸处理组的活性明显低于未用反义寡核苷酸处理组.相关分析发现,ACAT的活性与adipophilin蛋白的表达量有一定的联系,但不是直线相关.结果表明,adipophilin表达的高低与细胞摄入外源性脂蛋白,与ACAT的活性有一定的联系.提示adipophilin与脂滴的代谢功能密切相关,且ACAT有可能是其潜在的位点.

关键词：adipophilin、ACAT、巨噬细胞、胆固醇

所属期刊栏目：31

分类号：R361.3(病理学)

资助基金：湖南省教育厅科研项目01C191

在线出版日期：2004-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：930-935