10.3321/j.issn:1000-3282.2004.09.009
嗜肺军团菌mip/ctxB融合基因体外表达与动物免疫试验的免疫原性研究
PCR扩增嗜肺军团菌mip基因和霍乱弧菌ctxB基因,克隆入载体pcDNA3.1(+),重组子经限制性酶切分析、PCR、序列分析鉴定正确后,命名为pcDNA3.1-mip/ctxB.脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-mip、pcDNA3.1-mip/ctxB转染NIH3T3细胞,用免疫荧光法和蛋白质印迹鉴定瞬时表达和稳定表达产物,结果发现:重组质粒成功转入细胞并获得短暂表达,稳定转染细胞分别在24 ku和35 ku处检测到阳性杂交信号.将pcDNA3.1-mip、pcDNA3.1-mip/ctxB作为DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠体内抗原特异性抗体水平、脾淋巴细胞增殖活性、IFN-γ产生水平、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性等体液免疫和细胞免疫反应的指标,评价疫苗的免疫原性.结果发现:各实验组均检测到免疫原性,pcDNA3.1-mip/ctxB免疫组的免疫原性高于pcDNA3.1-mip免疫组,有显著性差异(P<0.01).研究结果为mip/ctxB融合基因DNA疫苗的研制提供了初步的实验依据.
嗜肺军团菌、霍乱弧菌、mip/ctxB融合基因、体外表达、免疫原性
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Q5(生物化学)
国家自然科学基金30300302
2004-10-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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818-823