东方鲎Factor C中的结构域在结合脂多糖中的作用

摘要：

Factor C是鲎血细胞中的一种丝氨酸蛋白酶原,因其能以高亲和力结合脂多糖(LPS),在医药产品的内毒素检测中起着重要的作用.以往研究表明处于N端的3个Sushi结构域对Factor C的LPS结合活性起着关键作用,而Factor C N端的其他3个结构域,包括Cys-rich结构域、EGF-like结构域和Lectin-like结构域对LPS结合活性的影响尚不清楚.利用Bac-to-Bac昆虫细胞表达系统可使rFactor C及其4个截短的片段rCES123L,rCES123,rS123L和rS123获得表达,并且可采用亲和层析柱将这5个重组表达产物纯化.通过测定5个重组表达产物的LPS结合活性及抑菌活性,可以确定Factor C的LPS结合位点位于S123区域.尽管Cys-rich结构域、EGF-like结构域和Lectin-like结构域中不存在LPS结合位点,但当这3个结构域同时存在时,可提高Factor C或CES123L的LPS结合能力,因此rCES123L具有与rFactor C非常相近的LPS结合能力.实验结果表明,rCES123L在昆虫细胞中的表达量比rFactor C高出4倍,预示出rCES123L在医药领域的应用前景.

关键词：LPS中和、LPS结合活性、LPS结合位点、体外抑菌活性

所属期刊栏目：31

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2004-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：736-740