10.3321/j.issn:1000-3282.2004.07.008
BPOZ基因剔除小鼠模型的建立
BPOZ是在卵巢癌等肿瘤组织中表达下调的细胞生长抑制基因,建立BPOZ基因剔除小鼠模型,可以为在体研究BPOZ基因的生物学功能及其与肿瘤发生的关系创造条件.运用生物信息学手段确定小鼠BPOZ基因组序列,设计基因剔除策略,构建完成了基因剔除载体XpPNT-BPOZ.以电穿孔方法将基因剔除载体导入ES细胞,用G418和Ganciclovoir进行正负筛选,获得抵抗克隆,PCR和DNA印迹鉴定出正确同源重组的ES细胞克隆.将同源重组的ES细胞注入小鼠囊胚,获得嵌合体小鼠.嵌合体小鼠与C57BL/6J小鼠交配后获得Aguoti毛色的小鼠30只,其中15只为BPOZ基因剔除杂合子小鼠,阳性率为50%.在雌雄杂合子交配的后代中获得纯合子小鼠.初步的表型观察发现BPOZ基因剔除小鼠发育正常,有繁殖能力,进一步的表型分析工作正在进行之中.
BPOZ基因、细胞生长抑制基因、基因剔除
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Q78(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金30370793;国家自然科学基金39925023;教育部长江学者奖励计划OOTPJS111;国家高技术研究发展计划863计划2001AA216081;上海市科技发展基金99JC14029,99XD14005
2004-08-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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