人α-乳清蛋白基因的克隆及其在转基因小鼠中高效表达

摘要：

从粘粒文库中筛选出人α-乳清蛋白基因,构建9.5 kb的转基因表达载体.利用显微注射的方法获得68只F0代小鼠,经PCR检测和DNA印迹分析证实有8只小鼠(4♂,4♀)为整合人α-乳清蛋白基因的转基因阳性小鼠,整合率为11.7%,整合拷贝数在1至8之间.利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测和蛋白质印迹分析,4只雌性F0代转基因阳性小鼠全部表达了人α-乳清蛋白.放射免疫测定法测定,含量分别为0.62 g/L、0.48 g/L、0.56 g/L、3.21 g/L;同时测定F0代50号转基因公鼠的后代阳性母鼠(50-2号)乳样中人α-乳清蛋白含量也达到1.03 g/L,证明由原代转基因公鼠遗传给后代的人α-乳清蛋白基因亦获得了稳定的表达.所构建的人α-乳清蛋白转基因载体具有结构较小,表达量高,可以稳定遗传等优点.为利用人α-乳清蛋白基因改善牛乳成分和品质奠定了基础.

关键词：人α-乳清蛋白、转基因小鼠、表达

所属期刊栏目：31

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2002AA206111

在线出版日期：2004-06-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：244-248