JAB1与糖皮质激素受体的相互作用及对其转录活性的影响

摘要：

应用酵母双杂交方法筛选到与糖皮质激素受体(GR)结合的蛋白JAB1,进一步验证JAB1与GR的结合作用并证明其对GR的影响.构建与Ga14-BD融合表达的载体pGBKT7-GR LBD,与构建于pACT2载体上的人骨髓cDNA文库杂交,在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp选择培养板上培养,经X-α-gal检测,阳性克隆片段插入pGEM(R)-T Vector载体,测序,再经酵母双杂交和GST pull down蛋白质结合实验验证其结合作用,应用反映GR转录活性的CAT报告基因检测JAB1对GR的调节活性.结果在人骨髓cDNA文库中,筛选到42个X-α-gal检测变蓝且含有pACT2质粒序列的克隆,其中有5个克隆的序列皆为Jun活性区结合蛋白JAB1的一部分.酵母双杂交和蛋白质结合实验表明,JAB1与COS7真核表达的GR-LBD在体外有结合作用.JAB1加强GR转录激活的能力.

关键词：糖皮质激素受体、JAB1、转录因子、酵母双杂交系统

所属期刊栏目：31

分类号：Q5;R33

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划G1999054201

在线出版日期：2004-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：141-145