人尿激肽原酶的纯化与鉴定

摘要：

采用两性离子胶体沉淀和乙醇沉淀相结合的粗提方法,经离子交换、疏水层析、亲和层析及凝胶过滤4个步骤有效地将人尿激肽原酶(hk-1)粗提物纯化,比活提高了1 755倍,总得率为70%.用以慈菇蛋白酶抑制剂为配体的亲和层析纯化hk-1,效果理想,整个工艺路线适合产业化生产.纯化产物在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上为单带,高压液相色谱(HPLC)上为单峰,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测得分子质量为33 450 u,等电聚焦测得pI在4.3附近,为含糖蛋白.同时测定了该酶的热稳定性和pH稳定性.纯化过程中同时分离得到另一种药用蛋白--人尿胰蛋白酶抑制剂(HUTI).

关键词：人尿激肽原酶、人尿胰蛋白酶抑制剂、乙醇沉淀、胶体沉淀、离子交换、疏水层析、亲和层析、慈菇蛋白酶抑制剂

所属期刊栏目：30

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划Z18-03-29

在线出版日期：2003-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：772-777