随机单链DNA文库SELEX筛选寡核苷酸适配子方法的建立

摘要：

指数富集配基的系统进化(SELEX)技术是一种新的组合化学技术. 体外构建了一个长度为81 nt、含有35个随机序列的单链DNA(ssDNA)文库,优化了ssDNA文库扩增为双链DNA(dsDNA)文库的PCR反应条件.通过对比不对称PCR和生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA文库的效果,确定了以生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA.由于脱氧核糖核酸的疏水性导致ssDNA文库与硝酸纤维素滤膜的结合背景过高,因此选择以微孔板为介质,分离与靶蛋白结合的适配子. 经过9轮循环筛选,随机ssDNA文库与丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(C蛋白)的结合率从0.5%上升到32.5%.

关键词：随机ssDNA文库、指数富集配基的系统进化(SELEX)、寡核苷酸适配子、丙型肝炎病毒核心蛋白

所属期刊栏目：30

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金30200352;军队医药卫生科研项目01MB061

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：151-155