幽门螺杆菌AlpA基因中四种黏附素基因保守区的克隆、表达、纯化及鉴定

摘要：

幽门螺杆菌(Helicobacter priori,Hp)感染是慢性活动性胃炎和消化性溃疡的主要病因,与胃腺癌、胃黏膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤的发生亦密切相关.鉴于Hp已证实的四种粘附素保守区(AB)是外膜蛋白(OMP)和膜孔素(porin)样成分,而外膜蛋白和膜孑素样成分是优秀的疫苗候选抗原.用PCR技术扩增AB基因,将其定向插入pET 22b(+)载体,在BL21(DE3)大肠杆菌中表达.测序显示AB基因长588 bp,编码195个氨基酸.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶扫描分析,AB基因表达的蛋白质分子质量约为22.5 ku,其重组蛋白质表达量占菌体总蛋白质的29%,表达产物经亲和层析纯化后蛋白质纯度达96%.经免疫印迹证实该重组蛋白可以被AlpA免疫兔血清所识别.AB蛋白的获得为进一步研究Hp黏附素保守区的分子黏附机制和免疫防治作用提供了基础.

关键词：幽门螺杆菌、黏附素保守区、克隆、表达、纯化、鉴定

所属期刊栏目：29

分类号：Q78;R739(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划102 07-03-06;国家自然科学基金30270078;军队科研项目OIMA-132

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：922-926