10.3321/j.issn:1000-3282.2001.05.028
Cre/l0xP介导的伤寒杆菌染色体上插入基因的切除
来源于P1噬菌体的位点专一性重组系统loxP/Cre,已成为一种新的DNA操作的有用工具,在体内外都获得了成功的应用.为了将四环素诱导表达系统引入减毒伤寒杆菌CVD908株中,tetR-loxP-neo串联基因已通过同源重组被定位插入在CVD908株的△aroC位点中.构建一Cre酶表达受启动子PLteo-1控制的自杀质粒pJG9/Cre,以切除CVD908株/△aroC中同向loxP序列之间的neo基因.质粒pJG9/Cre电转化入菌中,加入去水四环素诱导Cre酶表达,通过重组切除nieo基因,再通过自杀质粒上SacB基因的启动,使质粒清除出菌细胞.抗生素鉴定和PCR扩增都证明,CVD908株△aroC位点中的neo基因被成功切除.
Cre、loxP、位点专一性重组、基因切除、伤寒杆菌
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Q784(基因工程(遗传工程))
国家高技术研究发展计划863计划102-07-04-04;国家自然科学基金39780024
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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