酵母己糖转运蛋白Hxt7启动子突变体的构建与表达

摘要：

葡萄糖在酵母细胞中的转运是通过一个庞大的己糖转运子家族实现的.Hxt7为一种高亲和性转运蛋白,在这个家族中的表达丰度最高.它的表达为低浓度葡萄糖所诱导.为了研究葡萄糖转运对细胞生长和葡萄糖阻遏的控制作用,提高对糖酵解通路和糖代谢过程的可调控性,该研究对HXT7启动子进行逐步删除,并将含启动子区域长短不同的HXT7基因整合转入酿酒酵母己糖转运子缺失菌株hxt△(hxt1～hxt7,gal2缺失)的基因组,构建一组仅含HXT7且表达水平不一的酵母启动子突变株.将HXT7在突变株中的表达与在野生菌株(MC996A)中的表达进行比较,对它们在含50 mmol/L葡萄糖培养基中的生长速率、葡萄糖消耗性能、HXT7 mRNA及蛋白质表达水平等进行了实时测定.结果表明,当葡萄糖浓度低于5 mmol/L时,HXT7的表达量最高.高浓度葡萄糖环境下,HXT7在突变株中的表达高于在野生株中的表达,显示出不完全性葡萄糖阻遏效应.HXT7的表达水平与启动子长短和基因拷贝数有关.位于-495至-346之间的149 bpHXT7启动子区域对HXT7的表达至关重要.启动子短于346 bp,HXT7基本不表达.

关键词：葡萄糖、转运子、Hxt7、启动子、删除、酵母

所属期刊栏目：28

分类号：Q5(生物化学)

资助基金：荷兰阿姆斯特丹大学校科研和教改项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：662-669