融合蛋白NusA-hRI的高效异源表达、纯化及活性分析

摘要：

人核糖核酸酶抑制因子(human ribonuclease inhibitor,hRI)是一种能够调节核糖核酸酶活性的酸性包浆蛋白.通过构建含SUMO、IF2、GST、NusA、MsyB、Trx和MBP融合标签的重组表达载体,以大肠杆菌BL21(DE3)作为宿主菌进行自诱导(auto-induction,AI)表达,从而使hRI的表达量得以提升.利用MagNi磁珠纯化及电泳分析hRI的表达状况,通过RNase/Sepharose亲和层析获得纯度较高的蛋白.纯化后获得的融合蛋白浓度为2 960.513mg/L,与其它公司的hRI活性进行比较,检测其酶活性约为50U/μl,并使其成功用于RNA的保护,为NusA-hRI的应用提供理论依据.

关键词：人核糖核酸酶抑制因子、融合标签、诱导表达、磁珠纯化、亲和层析

所属期刊栏目：39

分类号：Q816(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2019-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：21-28