干扰PKM2对人白血病细胞增殖和凋亡的影响及潜在机制

摘要：

目的:探讨糖酵解酶丙酮酸激酶M2型(PKM2)对人白血病细胞体外增殖和凋亡的影响及潜在机制.方法:将靶向PKM2的慢病毒载体转染人K562细胞株(shPKM2组),同时设立空载体转染组为对照(Vector组).采用qRT-PCR和Western blot技术分别检测Vector组和shPKM2组PKM2 mRNA和蛋白的表达以及自噬标志物的变化;CCK-8实验检测细胞体外增殖能力;流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平.结果:在稳定干扰PKM2后,PKM2的mRNA(=11.58,P=0.000 3)和蛋白水平(t=11.88,P=0.000 3)均明显降低.与Vector组比较,shPKM2组细胞体外增殖能力显著降低(F=118.87,P＜0.000 1).同时,干扰PKM2可使K562细胞周期阻滞在G1期,细胞凋亡率显著增加(t=37.23,P ＜0.000 1);使促凋亡蛋白Bax表达增加(t=15.36,P=0.000 1)、抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(t=9.965,P=0.000 6).此外,干扰PKM2可减弱K562细胞自噬水平,表现为LC3Ⅱ降低(tLC3Ⅱ=10.32,PLC3Ⅱ=0.000 5),而p62水平增加(tp62=14.59,Pp62=0.000 1).还发现自噬诱导剂能逆转shPKM2引起的白血病细胞体外增殖能力减弱(F =96.32,P＜0.000 1).结论:以上结果表明干扰PKM2可抑制人白血病K562细胞的体外增殖并促进其凋亡,其机制可能与PKM2介导的自噬活性降低有关,提示PKM2可能作为白血病诊疗的一个潜在靶点.

关键词：PKM2、白血病、增殖、凋亡、自噬

所属期刊栏目：39

分类号：Q291

资助基金：国家自然科学基金面上项目81873973;重庆市渝中区科技计划20170411;重庆市研究生科研创新CYS17155

在线出版日期：2019-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：13-20