定点突变提高醇脱氢酶LkTADH催化制备他汀关键手性砌块的酶活

摘要：

(S)-6-氯-3-羰基-5-羟基己酸叔丁酯[(S)-CHOH]是他汀类药物合成的关键手性中间体.利用醇脱氢酶催化6-氯-3,5-二羰基己酸叔丁酯不对称合成(S)-CHOH是很有潜力的制备路线,目前存在的主要问题是醇脱氢酶催化活性较低.首先对来源于Lactobacillus kefir DSM 20587的醇脱氢酶的四点突变体LkTADH(A94T/F147 L/A202L/L199 H)进行回复突变,确定了关键位点147和202,并获得比酶活提高1倍的突变体M F147L-A202L.对这两个位点进行饱和突变,获得比酶活比LkTADH提高1.47倍的突变体MF147I-A202L.其比酶活为10.17U/mg,为目前文献报道最高水平.通过动力学分析和分子对接,分析了突变位点对酶活影响的机制,为后续研究奠定了良好的基础.

关键词：醇脱氢酶、(S)-6-氯-3-羰基-5-羟基己酸叔丁酯、不对称合成、分子改造、饱和突变

所属期刊栏目：38

分类号：Q819(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金面上项目21676240;国家973计划2011CB710800

在线出版日期：2018-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：59-64