枯草芽孢杆菌壳聚糖酶水解制备低脱乙酰度壳寡糖及其组分分析

摘要：

对来源于枯草芽孢杆菌菌株168(Bacillus subtilis 168)的壳聚糖酶编码基因进行了序列优化及全合成,并在毕赤酵母(Pichia pastoris)中实现了分泌表达,表达产物的蛋白质浓度达到0.30mg/ml.表达的壳聚糖酶最适pH为5.6,最适温度为55℃,比酶活达84.54U/ml.该酶在50℃及以下较稳定.利用该酶水解低脱乙酰度壳聚糖并使用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(ultra-performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UPLC-QTOF MS)对产物的组分进行了分离及鉴定.根据一级质谱信息,推测酶解产物中包含至少37种聚合度2 ～18,不同脱乙酰度的壳寡糖组分.综上,利用毕赤酵母分泌表达了来源于枯草芽孢杆菌菌株168的壳聚糖酶基因,利用表达产物水解制备了低脱乙酰度壳寡糖并对其组分进行了分析,可为后续壳寡糖结构与功能关系的研究提供参考.

关键词：枯草芽孢杆菌、壳聚糖酶、毕赤酵母、壳寡糖、UPLC-QTOF MS

所属期刊栏目：38

分类号：TS245.9(食品工业)

资助基金：国家重点研发计划2016YFB0301502;国家自然科学基金联合基金U1608255

在线出版日期：2018-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：19-26