鸡OV启动子表达HA对禽流感病毒攻击提供完全保护

摘要：

鸡卵清蛋白(ovalbumin,OV)基因5'调控序列是构建鸡输卵管生物反应器的首选调控元件.以EGFP为报告基因,构建OV启动子真核表达载体,转柒原代输卵管上皮细胞和CHO细胞,筛选得到1.1kb的高效OV启动子.构建1.1 kb OV启动子表达H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白真核表达载体pOV1.1k-HA,转染CHO细胞.PCR、RT-PCR鉴定结果证明HA基因整合至CHO细胞基因组,并进行转录;SDS-PAGE、Western blot及HA试验结果证明HA蛋白在CHO细胞内的表达,并具有免疫反应性和血凝活性.以纯化的HA蛋白免疫4周龄SPF鸡,2周后加强免疫一次,加强免疫3周HI抗体水平为6.31og2;以106 EID50 H5N1 (A/Goose/Guangdong/1/96)亚型禽流感病毒鼻腔接种SPF鸡,免疫组100％存活,无排毒现象,对照组100％死亡.结果表明,筛选的1.1 kb OV启动子可有效驱动HA蛋白表达,表达的HA蛋白免疫SPF鸡对禽流感病毒攻击提供完全保护;为鸡输卵管生物反应器表达保护性抗原和珍贵药物蛋白奠定了基础.

关键词：鸡卵清蛋白启动子、HA、禽流感病毒、免疫保护、输卵管生物反应器

所属期刊栏目：38

分类号：Q819(生物工程学(生物技术))

资助基金：兽医生物技术国家重点实验室自主课题SKLVBP2017010;国家自然基金项目30771615;“十二五”农村领域国家科技计划课题2011AA100305

在线出版日期：2018-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：67-74