重组大肠杆菌转化甘油合成聚3-羟基丙酸-co-乳酸

摘要：

聚羟基脂肪酸酯作为性质优良的生物塑料,引起了广泛的关注.由于聚羟基脂肪酸合成酶PhaC特异性较强,难以通过生物合成方法获得含乳酸单体聚合物.为了实现乳酸的聚合,PhaC的筛选至关重要.以甘油为底物,通过引入Klebsiella pneumoniae的甘油脱水酶DhaB123及其激活因子GdrAB以及Salmonella typhimurium LT2的丙醛脱氢酶基因PduP,获得3-羟基丙酰辅酶A;通过引入Megasphaera elsdenii DSM 20460的丙酰辅酶A转移酶PCT,获得乳酰辅酶A;并对3种不同聚羟基脂肪酸合成酶的作用进行考察.在Pseudomonas putida的原始酶PhaC1或者PhaC2的作用下,不能实现乳酸的聚合;而在双位点突变(Ser325 Thr和Gln481 Lys)的PhaC1(STQK)存在条件下,重组菌可以利用甘油合成聚3-羟基丙酸-co-乳酸.经过对溶氧、有机氮源等发酵条件的优化,聚3-羟基丙酸-co-乳酸的产量可以达到0.22g/L,占细胞干重的3.2％,是含乳酸单体聚合物生物合成研究的一次有益尝试.

关键词：聚3-羟基丙酸-co-乳酸、聚羟基脂肪酸合成酶、丙酰辅酶A转移酶、位点突变、甘油

所属期刊栏目：38

分类号：O819

资助基金：国家自然科学基金31670089;中国科学院重点部署项目ZDRW-ZS-2016-3M

在线出版日期：2018-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：46-53