靶向B细胞并特异结合其分泌IL-10的重组融合蛋白的构建、表达和初步鉴定

摘要：

目的:CD19单链抗体可变区(single-chain fragment variable)scFv能特异性识别结合B细胞表面的CD19分子,白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)是调节性B细胞(Breg)的主要特征之一.旨在构建CD19scFv和IL-10受体1(IL-10R1)胞外段的重组融合蛋白,拟用该融合蛋白捕捉和封闭Breg细胞分泌的IL-10.方法:CD19scFv和IL-10R1胞外段克隆到pET-28a原核质粒上,E.coli BL21(DE3)工程菌表达蛋白通过镍柱富集和纯化蛋白,SDS-PAGE和Western blot对表达蛋白进行鉴定,Pull down实验验证蛋白与CD19分子和IL-10细胞因子的结合.结果:成功表达CD19scFv-IL-10R1融合蛋白,该融合蛋白能在体外同时结合CD19和IL-10分子.结论:CD19scFv-IL-10R1融合蛋白在体外可以同时结合CD19分子和IL-10分子,具有潜在应用前景可作为特异性抑制Breg的生物小分子.

关键词：IL-10、调节性B细胞、IL-10受体1、CD19单链抗体可变区

所属期刊栏目：38

分类号：Q819(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金81471910,31370197,21572173,31770145;湖北省医学领军人才计划523-276003;湖北省技术创新专项2016ACA150,2016CFA062,2015CFA009;武汉市科技晨光计划2016070204010127

在线出版日期：2018-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-6