人白血病抑制因子在原核细胞中的表达与纯化

摘要：

研究证明人白血病抑制因子(hLIF)是一种对多种不同类型的细胞和组织具有重要功能的细胞因子,其独特的生物学特性使其被广泛应用.介绍了自制的具有生物活性的hLIF,将hLIF基因克隆到pET32a中,并利用硫氧还蛋白(TrX)作为融合配体,在大肠杆菌中成功表达可溶性融合蛋白Trx-hLIF.亲和层析纯化后利用SDS-PAGE和Western blot对纯化结果进行检验.利用肠激酶(EK酶)切割融合蛋白,释放hLIF,随后通过简单的阳离子交换得到纯度高达98.1％的hLIF4.75mg.小鼠M1髓系白血病细胞增殖分析测定纯化的rhLIF的功能与hLIF具有相似的生物活性,EC50为5ng/ml,对应的比活性为0.5×107 IU/mg.

关键词：白血病抑制因子、诱导、表达、简单纯化

所属期刊栏目：37

分类号：Q819(生物工程学(生物技术))

资助基金：中央高校基本科研业务费专项资金SCU2015D008;四川应用基础研究计划项目2014JY0199

在线出版日期：2017-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：7-14