小鼠c-Myc基因的克隆表达及其纯化

摘要：

目的:克隆小鼠c-Myc基因,构建原核表达载体并对其进行蛋白表达及纯化.方法:以TetO-FUW-OSKM质粒为模板经PCR扩增c-Myc基因,再通过基因重组技术与pET-3C载体相连转化大肠杆菌DH5α.经抗性筛选,PCR鉴定阳性重组子,测序正确后,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE对重组蛋白进行鉴定分析.结果:DNA电泳结果证实PCR扩增产物与预期大小一致,DNA测序结果显示与GenBank公布的c-Myc基因序列一致,IPTG诱导SDS-PAGE电泳后,在分子量64kDa左右出现诱导后蛋白新增条带,与预测的c-Myc分子量大小一致.结论:成功地构建了pET3C-Myc原核表达载体,表达并纯化出了c-Myc蛋白,为今后研究c-Myc蛋白及相关蛋白诱导体细胞成多能干细胞打下基础.

关键词：c-Myc基因、基因克隆、基因表达

所属期刊栏目：37

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：广东省自然科学基金2015A030313527;广东省省级科技计划项目2013B031800014;东莞市社会科技发展项目2013108101062;浙江省自然科学基金LY13H080004

在线出版日期：2017-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：20-25