α-溶血素的表达及其纳米孔的制备

摘要：

α-溶血素(α-hemolysin,αHL)是金黄色葡萄球菌分泌的一种水溶性穿孔毒素,在双脂膜上可组装成结构稳定的七聚体蛋白纳米孔,是理想的单分子检测器件.以大肠杆菌BL21(DE3)pLysS作为表达宿主菌株诱导表达野生型和单位点突变型α-溶血素,超滤膜分子截留法纯化蛋白质,使用兔血红细胞膜将oHL单体组装成七聚体蛋白纳米孔,并在人工脂双层膜上构建适于单分子分析的分子器件.通过溶血实验和单通道电流记录,证实oHL溶血活性良好,组装的αHL七聚体纳米孔在双脂膜上打孔能力和离子通透性良好,结构稳定,可作为理想的单分子检测器件.此方法为大量制备αHL单体及其在单分子分析和应用研究方面奠定了基础.

关键词：α-溶血素、蛋白纳米孔、单通道电流、单分子检测器件

所属期刊栏目：37

分类号：Q819(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金21175105,中国博士后基金2012M521795资助项目

在线出版日期：2017-03-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：53-57