基于分子结构评价的Bacillus subtilis β-1,4-内切木聚糖酶胰蛋白酶抗性的理性设计

摘要：

饲料用酶在饲喂过程中,不可避免地会受到消化道中蛋白酶的破坏而令其使用效率受到影响,因此,饲料酶的蛋白酶抗性是其十分重要的性质之一.基于酶反应原理与计算化学理论对Bacillus subtilis 168β-1,4-内切木聚糖酶(XynA)的胰蛋白酶抗性进行理性设计,最终得到三个突变体——XynAR121C、XynA R121C/K98Q和XynAK39I.酶学性质分析显示XynAR121C和XynAR121C/K98Q与野生型(XynA)的最适反应温度均为60℃,XynAK39I为40℃;突变体酶与野生型酶的最适pH都是6.0;人工肠液(pH 6.8,10 mg/ml胰蛋白酶溶液)处理野生型及其突变体后,XynAR121C/K98Q和XynAR121C的残留酶活力均明显比野生型高,它们的半衰期分别是野生型的2.02倍和1.52倍,XynAK39I在胰蛋白酶溶液中的半衰期为90min,比野生型缩短了37 min.

关键词：理性设计、木聚糖酶、胰蛋白酶抗性、酶稳定性

所属期刊栏目：36

分类号：Q819(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2013AA102801,广东省省级科技计划项目2013B090600141资助项目

在线出版日期：2016-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：80-88