一种适用于片段替换/插入突变扫描的克隆方法

摘要：

功能序列的改造是基因工程的一项基础技术.序列改造往往涉及较大片段的插入或替换,为了获得更优化的改造序列,这种片段插入或替换经常需要以扫描方式进行.传统的酶切连接方式在这种情况下可能难以实现或者费时费力.建立了一种golden gate方法结合混合克隆和快速鉴定的策略(简称Gmix),利用该策略,成功地将外源基因(Gaussia荧光素酶基因)以4种模式,扫描式插入或替换HBV复制质粒的指定区域.该方法成功率高,操作简便快速且成本较低,适合于其他DNA序列的类似改造工作.

关键词：克隆、基因工程、Golden gate、片段扫描、方法

所属期刊栏目：36

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金81471946、重庆市科委项目cstc2015jcyjA10023,cstc2012jjA10135资助项目

在线出版日期：2016-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：55-63