6-羟基-3-琥珀酰吡啶单加氧酶HspB的结构研究

摘要：

在蛋白晶体结构难以获得的情况下,通过设计突变体来获取6-羟基-3-琥珀酰吡啶单加氧酶HspB的结构信息.首先获取HspB蛋白的同源序列并进行比对,之后对HspB蛋白进行同源建模和从头建模,并与底物2,5-二羟基吡啶(HSP)进行对接模拟;通过分子模拟、序列比对和参考同源蛋白晶体三种方式,设计并构建HspB酶的25个突变体;通过突变体的表达纯化和酶动力学常数测定来研究HspB的结构性质.根据实验结果,推测FAD的正确结合在稳定HspB蛋白结构中具有重要的作用,同时推测底物HSP和辅酶NADH处于同一活性中心并与不同位点相互作用.吡啶衍生物是极具工业价值的化合物,生物催化法是合成吡啶衍生物的有效途径,而吡啶衍生物的生物催化研究较少,通过考察突变体的性质,推测了HspB的部分结构信息,为此类吡啶单加氧酶的工业改造和应用奠定了基础.

关键词：HspB、突变体、结构信息、酶动力学常数

所属期刊栏目：35

分类号：Q816(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金31422004,31270154,31230002、上海市青年科技启明星项目13QA1401700资助项目

在线出版日期：2015-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：68-75