RF克隆结合巢式PCR构建金黄色葡萄球菌组氨酸蛋白激酶AgrC表达载体

摘要：

AgrC蛋白是位于金黄色葡萄球菌细胞膜上的组氨酸激酶,能够感受细胞外的化学信号并将信号传递到细胞内,进而调控细胞内与致病性相关的一系列基因的表达.利用无限制克隆法(RF克隆),并结合巢式PCR成功构建了AgrC表达载体pET-28a-AgrC.将表达载体电转入大肠杆菌中,并利用IPTG进行诱导表达AgrC蛋白.再经过低温超高压破碎、超高速离心、金属螯合层析与尺寸排阻层析等过程,分离纯化得到AgrC蛋白.

关键词：金黄色葡萄球菌、AgrC、无限制克隆法、巢式PCR

所属期刊栏目：34

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2014-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：55-60