药用级微生物谷氨酰胺转胺酶的纯化工艺研究

摘要：

为了提高谷氨酰胺转胺酶的纯度和扩展在医药领域的应用,探索了一种适合工业化生产的、安全高效的微生物谷氨酰胺转胺酶纯化方法.轮枝链霉菌发酵后,经离心10 000 r/min 4℃除去菌体,调节发酵液电导率至4.1 mS/cm和pH6.0后,以直线流速60cm/h通过SP Sepharose FF阳离子交换层析柱对目的蛋白高选择性和高载量地捕获,再通过phenyl sepharose 6 FF(high sub)疏水层析柱进行精细纯化.纯化后经SDS-PAGE鉴定纯度达到95％以上,HPLC分析纯度＞99％.鲎试剂测定内毒素含量为0.013EU/rnl,达到中国药典中血制品要求的低于0.15EU/ml标准.

关键词：谷氨酰胺转胺酶、离子交换层析、疏水层析、纯化

所属期刊栏目：34

分类号：Q555+.6(酶)

在线出版日期：2014-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：53-58