中介蝮蛇毒纤溶酶基因真核表达载体的构建及其功能的研究

摘要：

目的:蛇毒纤维蛋白溶解酶能直接溶解纤维蛋白或纤维蛋白原,在心脑血管疾病的治疗方面具有潜在的应用价值.方法:采用双酶切技术从pMD18T-FLE Ⅰ克隆载体上获得中介蝮蛇毒纤溶酶基因编码区,再将其亚克隆到真核表达载体pFASTBACHTa上,经转化、筛选和鉴定,获得重组真核表达质粒pFASTBACHTa-FLE.重组质粒经小鼠尾静脉快速注入小鼠体内,进行瞬时表达.结果:经SDS-PAGE和Western blot检测,表明在小鼠肝脏组织中有重组FLE蛋白表达.免疫组织化学检测证明该蛋白在小鼠肝脏组织中大量表达.纤维蛋白平板法鉴定该重组蛋白具有较高的纤溶活性,其活性呈现出剂量相关性和时间依赖性.因此为进一步对中介蝮蛇毒纤溶酶的应用奠定了坚实的基础.

关键词：中介蝮蛇、纤溶酶、真核表达、纤溶活性

所属期刊栏目：32

分类号：Q782;Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：黑龙江省自然科学基金面上项目C200922

在线出版日期：2013-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-6