利用移码突变和终止密码子提高下游目的基因的表达水平

摘要：

目的:在基因结构复杂的慢病毒载体插入报告基因并提高目的基因表达量.方法:慢病毒载体上有复杂的基因排列,为了不影响慢病毒载体的活性,必须尽量保留原有的基因,替换不必要的基因.首先将报告基因萤光素酶插入慢病毒载体替换基因Env后,结果检测不到报告基因的表达.为了提高报告基因的表达水平,将报告基因的读码框向后移动一个碱基,同时在其上游增加一个终止密码子,然后检测报告基因的表达水平.结果:通过移动报告基因的读码框同时在上游增加终止密码子,使报告基因的表达水平大大提高.结论:在构建基因表达载体时,通过改变目的基因与上游起始密码子ATG之间的相对位置以及增加终止密码子,可以大幅提高目的基因的表达水平.

关键词：慢病毒载体、报告基因、基因表达、定点突变

所属期刊栏目：31

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30872223;"十一五"国家科技重大专项2008ZX10001-013

在线出版日期：2011-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：92-96