转豇豆胰蛋白酶CPTI基因棉花检测用标准分子的制备

摘要：

利用PCR的方法克隆豇豆胰蛋白酶基因CPTI、基因表达调控元件35S启动子、NOS终止子以及棉花内标基因Sad1,连接到克隆载体上,构建成质粒标准分子pGB,PCR检测过程中,质粒标准分子和转基因棉花中能扩增出4个目的条带,而非转基因棉花中不能扩增出相应的条带,证明构建好的质粒标准分子能用于转基因棉花的定性检测.荧光定量PCR绘制4个目的基因片段的标准曲线,各标准曲线的相关系数均达到0.985以上,说明建立的PCR具有很好的Ct值-初始浓度相关性,达到定量分析的需求,而且荧光定量PCR反应具有很好的重复性和稳定性,可用于实际样品的定量检测.

关键词：标准分子、转基因棉花、定性检测、定量检测

所属期刊栏目：31

分类号：Q819(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家"十一五"重大科技专项资助项目2009ZX08012 - 008B;2009ZX08012-019B;2008ZX08010-3

在线出版日期：2011-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：85-91