过量表达AtNHXS1新基因提高烟草耐盐性的研究
拟南芥液泡膜上的Na+/H+逆向转运蛋白是由AtNHX1基因编码的一种重要的植物耐盐性因子.AtNHXS1是利用DNA改组(DNA shuffling)技术对AtNHX1基因进行定向分子进化获得的新基因.利用农杆菌介导的叶盘法将该基因转入烟草中,经过潮霉素和PCR鉴定,得到了10个独立的转基因株系.对其中两个PCR阳性株系进行Southern blot鉴定,确定AtNHXS1以单拷贝的形式成功地插入到烟草的基因组中.荧光定量PCR分析表明,AtNHXS1基因可以利用烟草的转录体系正确转录.在盐处理下,随着盐浓度的提高,植株不同组织部位AtNHXS1基因的表达均有不同程度的提高,其中叶片上调趋势最明显.耐盐性试验结果表明,盐处理下,转基因烟草的长势明显优于野生型.400 mmol/L NaCl处理下,野生型烟草完全死亡,转基因烟草生长受到抑制,但是仍然能够正常生长.研究结果表明,AtNHXS1新基因能够显著提高烟草的耐盐性.
烟草、AtNHXS1、DNA改组技术、耐盐性
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Q789(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金资助项目3067336
2011-11-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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